Chromatografia na tenkej vrstve: jednoduché metódy pre komplexnú analýzu

2024 Autor: Howard Calhoun | [email protected]. Naposledy zmenené: 2023-12-17 10:39

Tenkovrstvová chromatografia zaujíma popredné miesto v kvantitatívnej a semikvantitatívnej analýze komplexných farmaceutických, prírodných, biomedicínskych, technologických, chemických a mnohých ďalších látok. Chromatografia na tenkej vrstve je tiež najdostupnejšou metódou pre hromadnú analýzu takmer akejkoľvek triedy látok.

Táto metóda separácie a analýzy viaczložkových systémov je široko používaná v laboratóriách rôznych špecifík a smerov: sanitárnej a epidemiologickej, veterinárnej, agrochemickej, výskumnej, forenznej, ako aj na staniciach ochrany rastlín, v štandardizačných centrách a úradoch forenznej lekárskej expertízy.

Hlavné výhody tenkovrstvovej chromatografie založenej na pohybe eluentu (rozpúšťadla analytu) vo vrstve sorbentu v dôsledku takzvaných kapilárnych síl,sú jednoduchosť a jednoduchosť chromatografického procesu, vysoký stupeň presnosti analýzy a relatívne nízke náklady na potrebné vybavenie.

Tenkovrstvová chromatografia s vysokým stupňom citlivosti (nízky prah detekcie) a selektivity umožňuje určiť 10-20 μg látok s presnosťou až 7 %, čo je veľmi vysoký ukazovateľ. Chromatografia na tenkej vrstve môže byť adsorpčného a distribučného typu. Prvá možnosť je najpoužívanejšia.

Podstatou metódy tenkovrstvovej chromatografie je pohyb rozpúšťadla látky vo vrstve sorbentu a priestorové rozloženie rôznych zložiek v závislosti od ich individuálnych charakteristík a vlastností. Faktom je, že molekuly rôzneho zloženia a štruktúry sa sorbujú (ukladajú) na pevný povrch chromatografickej platne rôznymi spôsobmi. Preto sa zložité viaczložkové systémy postupne delia na samostatné komponenty.

Oddelené, už oddelené zložky, ktoré sa pohybujú po vrstve sorbentu rôznymi rýchlosťami, tvoria chromatogram. Každá farebná škvrna zodpovedá konkrétnej chemikálii. Súčasne sa bezfarebné látky osvetľujú ultrafialovým svetlom, pod vplyvom ktorého mnohé zlúčeniny začnú fluoreskovať, prípadne sa ošetria špeciálnym farbiacim činidlom.

Medzi modernými analytickými metódami vyniká plynovo-kvapalinová chromatografia. Táto metóda separácie a analýzysa vyznačuje použitím špeciálnej neprchavej kvapaliny ako sorbentu, ktorá zmáča práškový keramický materiál. A ako hnacie médium sa tu používajú rôzne inertné plyny. Táto metóda je najúčinnejšia na štúdium zložitých zmesí obsahujúcich stovky rôznych komponentov.

Ďalšou modernou metódou na štúdium zloženia zložitých látok je kvapalinová chromatografia. Hlavnou črtou tejto metódy je separácia jednotlivých zložiek využitím rozdielov v ich distribúcii medzi mobilnou (eluent) a stacionárnou (sorbent) fázou. Táto metóda sa najčastejšie používa pri analýze rôznych organických zlúčenín (potravinárske prísady, pesticídy, rôzne toxíny atď.). Táto metóda chromatografického výskumu sa používa aj na kontrolu kvality farmakologických prípravkov, stanovenie obsahu steroidov v biologických tekutinách, analýzu aminokyselín a ďalšie veci.